Analiza calitativă pentru hepatita C

Lasă un comentariu 9,080

O analiză calitativă a reacției în lanț a polimerazei - PCR pentru hepatita C determină prezența sau absența VHC în organism. În condiții de laborator, se studiază structura ARN, care va include virusul. În cazul detectării virusului C, este necesar să se efectueze un curs de tratament, deoarece starea neglijată a ficatului va avea consecințe grave. PCR de înaltă calitate se efectuează și după recuperare pentru a confirma absența anticorpilor. Atribuit pentru inspecția de rutină. Cu o concentrație scăzută a agentului cauzal în sânge, PCR (calitativ) nu poate detecta nimic, deoarece sistemul de diagnosticare are propriile praguri de sensibilitate. În cazul fazei inițiale a bolii sau a formei ușoare, ultra-diagnoza PCR se efectuează pe echipamente ultrasensibile.

Ce este virusul ARN?

Termenul ARN al virusului hepatitei C (sau al virusului hepatitic C virus) este boala hepatică în sine. Virusul C se leagă de celula sănătoasă a corpului prin penetrarea în interior. În timp, răspândit în tot corpul, este necesar doar pentru a intra în sânge. Ca urmare, agentul patogen penetrează ficatul, se fixează cu celulele sale și lucrează din greu. Celulele hepatice (hepatocite) lucrează sub influența sa, suferă modificări și, din acest motiv, mor. Cu cât virusul C este mai lung în ficat, cu atât crește numărul celulelor. În timp, dezvoltați boli periculoase care duc la degenerare malignă și moarte.

Infecția ficatului cu acest tip de virus nu se poate manifesta pe plan extern. Timp de mai mulți ani sau zeci de ani, o persoană infectată se simte complet sănătoasă și doar o examinare aleatorie relevă cel mai adesea patologia. Când se donează sânge pentru hepatită, este examinată o parte a lanțului de ARN (acid ribonucleic), care face parte din gena umană (ADN). Rezultatele testelor de laborator nu ar trebui utilizate pentru auto-tratament, deoarece acesta este doar un indicator. Imaginea exactă și diagnosticul suplimentar sunt mai bine determinate de medic.

Când ați făcut: indicații pentru cercetare

În confirmarea VHC se efectuează analiza PCR (reacția în lanț a polimerazei). Studiile de PCR ajută la găsirea materialului patogen în structura ARN și prescrie o terapie eficientă. Numit în următoarele cazuri:

  • detectarea semnelor de inflamație a ficatului;
  • studii de screening pentru prevenire;
  • examinarea persoanelor aflate în contact;
  • diagnosticul de hepatită de origine mixtă (determinarea principalului agent patogen);
  • determinarea nivelului activității de reproducere a virusului în forma cronică;
  • ciroza hepatică;
  • pentru a determina eficacitatea tratamentului prescris.
Studiile de PCR sunt prescrise de un medic pentru a determina eficacitatea unui curs de tratament pentru hepatită.

Există o analiză atât calitativă, cât și cantitativă a PCR. PCR cantitativ indică raportul procentual dintre ARN și purtătorii de virusuri din sânge, iar calitativul indică prezența sau absența virală. Un indicator pozitiv al calității (prezența ARN-ului hepatitic C) necesită, de asemenea, cercetări cantitative. Un nivel ridicat de concentrație a agentului cauzal al hepatitei C este asociat cu riscul transmiterii sale, adică a infecției altor persoane. Numărătoarea redusă este mai bine tratabilă. Cantitatea de virusuri ARN din sânge nu este legată de intensitatea bolii. Analiza PCR se efectuează, de asemenea, în cazul terapiei cu interferon, pentru a prescrie durata și complexitatea cursului de tratament.

Caracteristicile analizei PCR de înaltă calitate pentru hepatita C

O analiză calitativă cu indicele de reacție în lanț a polimerazei este atribuită tuturor pacienților care au anticorpi la sângele hepatitei C. Cei care au fost bolnavi și recuperați trebuie să reia testul. Se recomandă trecerea testului pentru hepatita B, apoi, în cazul unei concluzii pozitive, și pentru hepatita D. De asemenea, reacția analizată calitativ trebuie efectuată împreună cu alte teste de sânge. Analizele vor arăta o imagine completă a răspândirii virale.

Din rezultatele testului, numai un test pozitiv pentru hepatita C va fi vizibil sau negativ, adică prezența sau absența unui virus. Dacă ieșirea este "detectată", virusul este și continuă să fie activ. Denumirea "nu a fost detectată" indică absența unui virus sau cantitatea mică. Cu acest indicator, trebuie avut în vedere faptul că sensibilitatea analitică a sistemelor de diagnosticare este diferită și că hepatita C de ARN poate fi încă în sânge, dar nu se manifestă în analiză.

Metoda PCR extrem de sensibilă, ultra-hepatita C, dezvăluie chiar și în cantități mici. Se utilizează un studiu de hibridizare fluorescentă, care este de multe ori mai mare decât sistemele standard PCR. Metoda este utilizată în mai multe cazuri:

  • presupuse forme ascunse de hepatită C;
  • Diagnosticarea PCR nu a confirmat patogenul, dar există anticorpi;
  • în cazul recuperării;
  • pentru a detecta infecția precoce.
Înapoi la cuprins

Analiza de decodificare

Decodificarea PCR a VHC afectează decizia finală atunci când face un diagnostic, în special cu metoda ultrametod. Principalul dezavantaj al acestui studiu este aderența strictă la condițiile sterile pentru eșantion și materiale. O ușoară abatere uneori prezintă concluzii analitice inexacte, complică diagnosticul și tratamentul ulterior. Analiza PCR pentru determinarea ARN-ului hepatitic nu prezintă întotdeauna cu încredere o imagine a bolii, uneori inexactități sunt permise și în ambele direcții.

Diagnosticarea virusului hepatitei, se recomandă utilizarea unui examen cuprinzător.

Norma indicatorilor

Absența anticorpilor JgM la hepatita virală C în rezultatele studiului este considerată normă în analiza reacției în lanț a polimerazei. În același timp, rezultatele analizei serologice indică prezența anticorpilor la virusul C și acest lucru este, de asemenea, în limitele normale. O definiție calitativă nu indică intensitatea bolii, ci doar dezvăluie agentul cauzator al hepatitei C în ARN. Această analiză este repetată după tratament pentru a confirma recuperarea efectivă.

abateri

Dacă sunt prezente anticorpi JgM la ARN-ul HCV, aceasta indică o infecție în curs de dezvoltare. Boala în același timp se desfășoară acut sau cronic, manifestată în diferite etape. Dacă se înregistrează o scădere a numărului de anticorpi, analiza va indica faptul că rezultatele tratamentului au fost obținute în timpul recuperării. Doar cazuri extrem de rare de fals pozitive se găsesc în diagnostic. Acestea se găsesc la femei în timpul sarcinii și la persoanele cu alte boli infecțioase.

Costul testelor de sânge și PCR pentru hepatita C

Hepatita C este o patologie inflamatorie in care celulele hepatice sunt afectate. Boala se dezvoltă ca urmare a penetrării virusului hepatitei C (HVC) în corpul uman.

Forma bolii poate fi acută sau cronică.

Cel mai adesea, simptome de forme acute ale bolii, majoritatea pacienților nu sunt disponibile, uneori, boala este însoțită de dureri în abdomen, a scăzut de performanță, oboseală crescută, tulburări de apetit, nuanță închisă de urină, modificări de culoare de fecale, îngălbenire a pielii și mucoaselor, dureri articulare. Aceste simptome apar de obicei la 6-8 săptămâni după infectare, dar pot apărea după șase luni.

Odată cu dezvoltarea unor astfel de fenomene, este necesar să se contacteze o instituție medicală și să fie supus unei examinări cuprinzătoare a întregului organism. Ca parte a unui examen medical, se efectuează un test de sânge pentru hepatita C.

Astăzi, cu ajutorul tehnicilor moderne de diagnosticare, această patologie poate fi identificată în stadiul inițial de dezvoltare, ceea ce sporește foarte mult șansele de vindecare completă a bolii.

Următoarele grupuri de persoane trebuie să testeze hepatita C:

  • femeile în perioada de purtare a unui copil;
  • persoanele cu semne de hepatită;
  • personalul medical;
  • potențiali donatori de organe și de sânge;
  • dependenții de droguri, persoanele infectate cu HIV, viața promiscuă intimă.

Lista studiilor necesare

Ce teste trebuie să iau pentru hepatita C? Pentru a diagnostica exact boala, a identifica cauzele și a determina starea parenchimului hepatic, sunt necesare următoarele studii:

  • urină generală și teste de sânge;
  • analiza biochimică a sângelui;
  • Analiza PCR;
  • test de sânge pentru detectarea anticorpilor la HVC;
  • un test de sânge pentru anticorpii existenți la propriile celule hepatice;
  • biopsie hepatică.

Decodificarea testelor de sânge pentru hepatita C este efectuată de un specialist. Luați în considerare fiecare metodă de cercetare în detaliu, precum și vom înțelege ce analiză a hepatitei C este cea mai corectă.

Analiză generală

Atunci când efectuați un test de sânge general pentru hepatita C, puteți evalua starea pacientului. Modificările parametrilor sângelui nu sunt percepute ca simptome specifice ale hepatitei, dar cu această boală există tulburări precum:

  • concentrația redusă de hemoglobină, trombocite și leucocite;
  • crește conținutul de limfocite;
  • coagularea sângelui este încălcată;
  • viteza de sedimentare a eritrocitelor (ESR) crește.

Analiza generală a urinei face posibilă detectarea, în compoziția sa, a urobelinului - un pigment biliar care apare în urină ca urmare a funcționării insuficiente a ficatului.

Analiza biochimică

Analiza biochimică a sângelui la hepatita C face posibilă identificarea unor astfel de afecțiuni precum:

  • crescute ale enzimelor hepatice (alanin transaminazei - ALT și AST - AST), care intră în sânge atunci când este afectat hepatocite. În condiții normale, acești indicatori pentru bărbați nu trebuie să fie mai mari de 37 UI / l, pentru femei - nu mai mari de 31 UI / l. O concentrație crescută de ALT și AST în hepatita asimptomatică C este adesea singurul simptom al acestei boli. În plus, creșterea fosfatazei alcaline a glutamil transpeptidazei în sânge (în mod normal nu este mai mare de 150 UI / l).
  • conținutul de bilirubină (atât general cât și direct) din sânge este depășit. Dacă nivelul de pigment galben în ser depășește 27-34 umol / L, icter apar (până la 80 mol / l într-un mod simplu, 86-169 pmol / L - un moderat, peste 170 mmol / l - formă severă).
  • Nivelul de albumină este redus, concentrația gama globulinelor, dimpotrivă, este crescută. Gammaglobulinele sunt alcătuite din imunoglobuline - anticorpi care protejează organismul împotriva substanțelor care provoacă boli.
  • creșterea concentrației trigliceridelor în sânge.

Testul PCR

Utilizând tehnica PCR, este posibil să se diagnosticheze agentul cauzal al bolii. Efectuarea acestei analize face posibilă detectarea unui virus în sânge, chiar dacă cantitatea sa este minimă. Analiza PCR pentru hepatita C face posibilă determinarea infecției existente în sânge deja după 5 zile de la momentul infecției, cu mult înainte de apariția anticorpilor.

Dacă rezultatul unui test de sânge pentru hepatita C prin PCR este pozitiv, aceasta indică prezența unei infecții active în organism. Folosind această metodă, puteți efectua un studiu calitativ și cantitativ al ARN-ului HVC.

În cursul analizei calitative a PCR pentru hepatita C, este posibil să se detecteze un virus existent în corpul uman.

Această procedură de diagnosticare se efectuează dacă se detectează anti-HVC în sânge.

Depistarea analizei pentru hepatita C conține informații despre faptul că o infecție a fost detectată sau nu a fost detectată în organism. În mod normal, nu se găsesc substanțe patologice în sânge.

Dacă testul hepatitei C este pozitiv, înseamnă că agentul patogen se împarte în mod continuu și infectează celulele hepatice.

Rezultatele acestei analize pot fi nesigure, este posibilă în următoarele cazuri:

  • biomaterial contaminat folosit;
  • în prezența heparinei în sânge;
  • în prezența substanțelor chimice sau proteice (inhibitori) în biomaterialul studiat, care afectează elementele PCR.

Analiza cantitativă a hepatitei C oferă informații despre cantitatea de virus conținută în sânge, adică determină încărcătura virală. Prin acest concept se înțelege volumul de ARN HVC prezent în sânge (de exemplu, în 1 ml). În interpretarea analizei cantitative pentru hepatita C, această valoare este exprimată în echivalent digital, măsurată în UI / ml.

Sângele pentru PCR pentru hepatita C este luat înainte de măsurile terapeutice. După ce analiza se efectuează la 1, 4, 12 și 24 de săptămâni. Studiul din săptămâna 12 este orientativ și se realizează pentru a evalua eficacitatea procedurilor medicale.

Dacă testul pentru hepatita C în timpul sarcinii este pozitiv și valorile încărcăturii virale sunt depășite, riscul de transmitere a agenților patogeni de la mamă bolnavă la copil crește de mai multe ori. De asemenea, cu valori crescute ale încărcăturii virale, implementarea măsurilor terapeutice este dificilă.

În conformitate cu transcrierea testelor pentru hepatita C, dacă valorile încărcăturii virale depășesc 800.000 UI / ml, atunci este mare. Dacă cifrele sunt sub 400.000 UI / ml, nivelul încărcăturii virale este considerat scăzut.

Analiza hepatitei C prin PCR este considerată cea mai corectă și are mai multe avantaje față de alte opțiuni de cercetare, și anume:

  • diagnosticul direct al agentului cauzal al bolii. Atunci când se efectuează studii tradiționale sunt determinate de prezența markerilor de proteine ​​care sunt produse reziduale ale agenților patogeni. Acest lucru indică numai faptul că infecția este prezentă în sânge. La testarea hepatitei C prin PCR, este posibil să se determine tipul de patogen al patologiei periculoase.
  • specificitatea tehnicii. În timpul acestei proceduri, o regiune unică de ADN este determinată în biomaterial care corespunde unui singur tip de agent patogen. Acest lucru minimizează probabilitatea rezultatelor false.
  • sensibilitate ridicată. Atunci când efectuați analiza PCR, puteți detecta cantitatea minimă de virus. Acest lucru este important dacă se identifică substanțe patogene condiționate, care reprezintă o amenințare numai dacă nivelul lor crește.
  • Atunci când se utilizează această tehnică într-o probă a biomaterialului, mai mulți agenți patogeni pot fi detectați dintr-o dată.
  • poate detecta infecții ascunse. În plus, analiza vă permite să diagnosticați microorganismele patogene care trăiesc în interiorul celulelor și au o variabilitate antigenică ridicată.

Dacă rezultatele testului sunt pozitive, atunci urme de virus se găsesc în biomaterial, atunci rețeaua are o infecție în organism.

O analiză PCR negativă pentru hepatita C înseamnă că nu există urme de infecție în biomaterial.

Studiu imunologic

Această metodă vă permite să identificați anticorpi la toate tipurile de virus hepatitic, precum și anticorpi la celulele hepatice ale propriului corp, aspectul căruia contribuie la dezvoltarea hepatitei autoimune.

Rezultatele obținute în timpul studiului sunt relevante timp de 3 luni, atunci ar trebui să redați sânge pentru hepatita C.

De asemenea, este posibil să se efectueze un studiu expres folosind benzi speciale de testare. Această analiză face posibilă determinarea anticorpilor la virusul C în compoziția sângelui și a saliva. Această procedură poate fi efectuată independent, la domiciliu.

Biopsie hepatică

Pentru a efectua o astfel de analiză, se efectuează un element al parenchimului hepatic și se efectuează o examinare histologică a biomaterialului obținut. Aceasta vă permite să evaluați starea corpului: să identificați focarele inflamatorii, necrotice, stadiul fibrozei și așa mai departe.

Astăzi sunt utilizate teste care înlocuiesc analiza histologică a parenchimului hepatic.

Pentru a evalua stadiul afectării hepatice și intensitatea procesului de inflamație, se utilizează biomarkeri sanguin venocizi specifici. Folosind FibroTest, puteți evalua gradul de creștere a țesutului fibros.

Când efectuați Actitest, puteți obține informații despre intensitatea proceselor patologice în parenchimul hepatic. Utilizarea Steatototesta poate diagnostica țesutul gras al ficatului și poate evalua amploarea acestui proces. Fibromax constă din toate testele de mai sus și poate include și alte studii.

Pregătirea pentru studiu

Ce teste sunt luate pentru hepatita C si cum am descoperit acest sau acel tip de cercetare. Este la fel de important să știți cum să vă pregătiți pentru analiză.

Pentru a obține rezultate fiabile, se recomandă respectarea următoarelor cerințe:

  • Testele hepatice C trebuie luate dimineața, pe stomacul gol. Ultima dată când alimentele trebuie consumate cu cel puțin 8 ore înainte de studiu.
  • Biomaterialul poate fi colectat în timpul zilei sau în seara. În acest caz, este important să treacă cel puțin 5-6 ore între ultima masă și analiză.
  • înainte de donarea de sânge pentru hepatita C, ceai, cafea, suc sau alte băuturi trebuie aruncate, este permisă numai apa.
  • Cu 48 de ore înainte de studiu, este necesar să se excludă utilizarea alimentelor grase, prăjite și băuturilor care conțin alcool.
  • cu cel puțin o oră înainte de analiză, trebuie să vă abțineți de la fumat.
  • analiza nu trebuie efectuată imediat după o examinare cu ultrasunete, instrumentală, radiografie, masaj sau fizioterapie.
  • cu o zi înainte de punerea în aplicare a studiului, este necesară excluderea utilizării medicamentelor și a activității fizice intense. Stresul emoțional este de asemenea contraindicat.
  • Se recomandă să petreceți 15 minute înainte de a efectua studiul într-o stare calmă.

Realizarea procedurii de colectare a sângelui

În cazul în care se obține testul pentru hepatita C? Eșantionarea biomaterialului pentru cercetări viitoare se efectuează în laboratorul unei instituții medicale sau la domiciliul pacientului.

Sângele dintr-o venă se administrează după cum urmează:

  • cu ajutorul unui turnichet special înfășurat în jurul antebratului pacientului, fluxul sanguin venos este oprit. Datorită unor astfel de manipulări, venele vor fi umplute cu sânge și vor fi mai vizibile, ceea ce va facilita foarte mult procesul de introducere a acului.
  • zona pielii în care se introduce acul este tratată cu atenție cu alcool sau lichid care conține alcool.
  • Un ac este introdus ușor într-o venă, apoi este atașat un tub de testare special conceput pentru colectarea sângelui.
  • Imediat după ce acul este introdus în venă, cablul de stoarcere este scos din brațul pacientului.
  • după ce s-a colectat volumul necesar pentru analiză, acul este îndepărtat ușor din venă.
  • un tampon steril de bumbac sau un tifon din tifon umezit cu alcool trebuie aplicat la locul injectării.
  • pentru a preveni apariția unui hematom, tamponul trebuie apăsat cu puțin efort împotriva zonei de introducere a acului, îndoiți brațul la articulația cotului și țineți-l în această poziție timp de câteva minute. Astfel de acțiuni vor ajuta, de asemenea, la stoparea mai rapidă a sângelui.

Cu condiția ca tehnica administrării interne să fie bună, această procedură este absolut sigură și nu provoacă senzații dureroase.

În cazuri rare, după recoltarea sângelui, venele se pot umfla. Acest fenomen se numește "flebită". O compresie (nu fierbinte) va ajuta la rezolvarea problemei, ar trebui aplicată pe zonele umflate ale pielii de mai multe ori pe zi.

Anumite probleme pot apărea și în cazul unei tulburări de sângerare. Luarea aspirinei, warfarinei și a altor diluanți ai sângelui poate cauza sângerare. De aceea, înainte de a efectua analiza, este necesar să refuzați să luați orice medicament. Dacă tratamentul nu poate fi anulat, trebuie să informați specialistul.

Date și prețuri

Cât de mult este testat pentru hepatita C? Rezultatele unui test de sânge pentru hepatită pot fi gata în câteva ore și în câteva zile (de regulă, nu mai mult de 8 zile). Durata pregătirii rezultatelor depinde de tipul de virus și de metoda de analiză aleasă. Mai rapid este studiul efectuat prin metoda PCR. Rezultatele în acest caz vor fi gata în doar câteva ore.

Cât costă un test de hepatită C? În funcție de clinică și de complexitatea studiului, prețul procedurii poate varia de la 400 la 11000 de ruble.

Trebuie să știți că poate dura câteva săptămâni pentru a forma o cantitate suficientă de anticorpi pentru HVC. Prin urmare, într-un stadiu incipient în dezvoltarea patologiei, rezultatul unui studiu poate fi fals negativ.

În plus, este posibilă obținerea unor date nesigure, cu analize de calitate slabă și încălcări ale condițiilor de transport a biomaterialului obținut (probele trebuie livrate la laborator maxim 2 ore după prelevarea de probe de sânge).

Dacă rezultatul studiului este pozitiv, trebuie să contactați imediat un medic pentru boli infecțioase. Specialistul va efectua o examinare suplimentară și va prescrie tratamentul adecvat.

Efectuarea unei analize PCR pentru hepatita C și decodarea rezultatelor

Analiza PCR a hepatitei C este un studiu al cărui principal scop este identificarea materialului genetic al agentului cauzal. Analiza dezvăluie agentul cauzal al bolii prin utilizarea reacției în lanț a polimerazei. Acest diagnostic are un grad ridicat de precizie, specificitate pentru a detecta absența sau prezența unei infecții virale.

Esența diagnosticului

Pentru a efectua o analiză PCR pentru determinarea virusului hepatitei C de la un pacient, se administrează sânge venos, care conține potențial ARN (acid ribonucleic) VHC al virusului dorit.

Testul PCR pentru hepatita C implică procedura când se adaugă următoarele la particulele de sânge ale pacientului:

  • primeri (regiuni scurte sintetizate artificial ale genei necesare);
  • enzima specială (ARN polimeraza).

După colectarea materialului biologic este trimis pentru cercetare în laborator. O parte din sânge este necesară pentru analiza PCR directă, a doua este trimisă la studiu prin metoda ELISA. Enzima este capabilă într-un timp scurt să crească numărul de material genetic al virusului agentului patogen. Într-un aparat special, se efectuează mai multe cicluri de procese de încălzire și de răcire. În etapa finală, materialul obținut este comparat cu genele virusului și se face o concluzie cu privire la prezența sau absența patologiei în corpul pacientului.

Esența și comportamentul analizei PCR în laborator. Înregistrat de laboratorul de medicină SiberianMedicalLaboratory.

Tipuri de cercetare

Există 3 tipuri de diagnostice care fac posibilă determinarea prezenței virusului hepatitei C în corpul uman:

  • genotipare;
  • de calitate;
  • cantitativ.

Metoda calitativă

Diagnosticul hepatitei C cu o metodă calitativă este aplicabil pacienților la care anticorpii virusului sunt detectați în testul de sânge. În cazul prezenței fazei acute a ARN VHC, astfel de măsuri de diagnosticare permit determinarea prezenței bolii în 1-2 săptămâni după infectare. În această perioadă, anticorpii împotriva hepatitei C nu pot fi încă dezvoltați.

Metoda cantitativă

Pentru determinarea concentrației virusului în probele de sânge se folosește o metodă cantitativă de diagnosticare. Un astfel de test pentru viremia (grad de concentrare) face posibilă determinarea cu precizie a numărului de unități de ARN viral. Rezultatul final este exprimat în volumul corespunzător. Dacă vorbim despre analiza cantitativă, atunci indicatorii sunt măsurați în 1 ml (1 cub. Cm).

Parametrul încărcăturii virale înseamnă nivelul infecțios al bolii, adică reflectă gradul de "infecțiozitate" al pacientului. În practică, aceasta înseamnă că cu cât este mai mare concentrația virusului în sânge, cu atât mai mari sunt șansele pacientului de a infecta alții cu hepatita C. O metodă cantitativă de cercetare permite, de asemenea, stabilirea calității și eficacității tratamentului efectuat.

genotipare

Genotiparea relevă mutații ale agentului cauzal al bolii. Înainte de a prescrie un plan de tratament, se determină genotipul virusului: calitatea și durata terapiei depind de acesta. De exemplu, în tratamentul bolii de tip I, eficiența este de 60%, în cazul tipurilor II, III - aproximativ 80%.

Beneficiile analizei PCR pentru hepatită

Printre principalele avantaje ale procedurii se numără:

  1. Posibilitatea diagnosticării precoce. Analiza PCR este capabilă să detecteze prezența unui virus în stadiile incipiente ale infecției.
  2. Rezultate scăzute de eroare. Resursa biologică studiată vă permite să diagnosticați o porțiune din materialul genetic care este caracteristică numai pentru un singur tip de infecție virală. Această circumstanță permite prevenirea rezultatelor false ale diagnosticului.
  3. Grad ridicat de sensibilitate. Analiza PCR este capabilă să detecteze virusul ARN în cantități mici, ceea ce permite, de asemenea, urmărirea infecțiilor latente în timp.

Indicații pentru

Testarea pentru PCR pentru hepatita C este necesară, dacă este disponibilă:

  • care au contact cu bolnavi, ceea ce ar putea duce la infecții;
  • simptome de ciroză hepatică (mărirea splinei, modificări nesemnificative în mărimea ficatului, detectarea unui plex venos pe abdomen sub piele);
  • rezultate pozitive ale testului ELISA;
  • activitate crescută a AST și ALT (manifestată în analiza biochimică a sângelui);
  • necesitatea de a controla comportamentul terapiei antivirale;
  • stadiul inițial al tratamentului pentru necesitatea de a stabili o încărcătură virală;
  • efectuarea stadiului final al terapiei pentru a elimina eventualele recidive;
  • prezența hepatitei B la pacient pentru a exclude dezvoltarea unei leziuni hepatice mixte.

Cum să vă pregătiți pentru donarea de sânge pentru studii PCR

Pregătirea pentru analiza PCR include următoarele recomandări:

  • sângele este luat dimineața;
  • analiza se face pe stomacul gol, deci este recomandabil să luați o pauză între ultima masă de 8-10 ore;
  • cu câteva zile înainte de diagnostic trebuie să fie excluse alimentele grase, picante și prajite, băuturile alcoolice și fumatul;
  • cu o zi înainte de analiză, trebuie să vă abțineți de efort fizic greu, să excludeți clasele în sala de gimnastică sau în piscină.

Rezultatele analizelor: norme și abateri

Analiza în sine nu este o perioadă îndelungată, iar specialistul hepatolog specialist sau specialist în boli infecțioase decriptează rezultatele PCR pentru hepatita C. Pe baza rezultatelor analizei, pacientul este diagnosticat.

Pentru a descifra în mod corect rezultatele sondajului, sunt luați în considerare următorii indicatori:

  • analiza biochimică a sângelui;
  • datele cu ultrasunete;
  • rezultatele biopsiei.

Interpretarea analizei cantitative

La obținerea rezultatelor analizei cantitative PCR, se iau în considerare următorii indicatori:

Teste de bază ale hepatitei C

Virusul hepatitic C este o problemă medicală și socială gravă. Aproximativ 180 de milioane de persoane din lumea de astăzi suferă de această boală, 350 de mii mor în fiecare an. Cursul latent lung (asimptomatic) al hepatitei C duce la diagnosticarea târzie. Analiza hepatitei C se efectuează pentru a diagnostica boala, diagnosticul diferențial, cu ajutorul său, determină boala transferată anterior "în picioare". Studiul este utilizat la pacienți cu simptome de hepatită C, valori crescute ale enzimelor hepatice în obținerea de informații despre istoria trecut de hepatită etiologie neprecizată la indivizii cu risc și de screening studiile.

Diagnosticul hepatitei C se efectuează în două etape:

Etapa 1 Determinarea prezenței în ser a anticorpilor la virusul hepatitei C (anti-VHC).

Etapa 2 În prezența testului anti-HCV este efectuată pentru prezența ARN (acid ribonucleic) PCR pentru hepatita C. Testul releva faza a procesului - pentru „activ / inactiv“, rezolva problema nevoii de tratament. Se știe că aproximativ 30% dintre persoanele infectate cu virusul hepatitei C elimină singură infecția, deoarece au un sistem imunitar puternic și nu au nevoie de tratament. Utilizarea PCR este determinată de genotipul virusului. Diferitele genotipuri răspund diferit la tratament.

Gradul de afectare a ficatului la hepatita C se determină utilizând o biopsie sau alte teste invazive și neinvazive (de exemplu fibrotest). Gradul de steatoză hepatică este determinat de steatotesta. În toate cazurile, diagnosticul de hepatită C ar trebui să se bazeze pe datele din ancheta epidemiologică, clinica bolii și datele testelor de sânge biochimice.

Fig. 1. Efectele severe ale hepatitei virale C - ascite intense.

Testul hepatitei C: anti-HCV

Anticorpii anti-HCV (anti-HCV) sunt markeri specifici ai infecției. În organismul unei persoane bolnave, anticorpii specifici sunt produși la proteinele virusului hepatitei C (antigene) - imunoglobulinele IgM de clasă și IgG (anti-HCV IgM / IgG).

La primirea unui rezultat pozitiv pentru anticorpi împotriva virusului hepatitei C, se efectuează un test de confirmare - determinarea anticorpilor totali față de proteinele structurale și nestructurale ale virusului. Proteinele structurale ale unui virus încapsulat E1 și E2 sunt generate de IgM anti HCV, nucleocapsida proteină C - cor (IgG anti HCV) și la 7 proteine ​​nestructurale-enzime NS - IgG anti HCV NS.

Pentru detectarea anticorpilor la virusul hepatitei C, se utilizează testul imunosorbant legat de enzime (ELISA). Testele de confirmare - RIBA (immunoblotting recombinant), mai puțin frecvent Inno-Lia (analiza peptidelor sintetice) sunt utilizate pentru a confirma rezultatele (+) ELISA.

Anti HCV IgM

  • Anticorpii HCV IgM apar în ser 4-6 săptămâni după infectare și ajung rapid la un maxim. La sfârșitul procesului acut (după 5 - 6 luni), concentrația lor scade.
  • Înregistrarea pe termen lung a prezenței IgM anti-HCV indică faptul că hepatita C a dobândit un curs cronic.
  • Creșterea nivelului de IgM în perioada de hepatită cronică C sugerează reactivarea procesului de infectare.
  • Nivelul imunoglobulinelor IgM vă permite să evaluați eficacitatea tratamentului.

Anti HCV IgG

Anticorpii IgG IgG apar în serul pacientului la 11 până la 12 săptămâni după infectare. La 5-6 luni, se înregistrează concentrația maximă. Următorii anticorpi

să rămână la un nivel constant pe întreaga durată a bolii în perioada acută și în timpul perioadei de recuperare.

Anticorp total pentru virusul hepatitei C

Anticorpii totali ai virusului hepatitei C (anti HCV total) sunt utilizați pentru a diagnostica cazurile "proaspete" ale bolii. Anticorpii totali sunt anticorpi la proteina nucleocapsidă C - cor (anti HCV IgG) și 7 enzime NS proteice nonstructurale (anti HCV NS IgG) anti HCV NS3, anti HCV NS4 și anti HCV NS5.

Anticorpul total la virusul hepatitei C apare in infectable ser sanguin după 11 - 12 săptămâni de la începutul infecției cu, ajungând la vârf la 5 - 6 luni și depozitate la un nivel constant pe toata durata bolii in faza acuta si timp de 5 - 9 ani după perioada de recuperare.

Fiecare dintre tipurile de anticorpi are o valoare independentă de diagnostic:

  • AntiHCVC (cor) sunt principalii indicatori ai contactului cu hepatita C.
  • AntiHCVNS3 a detectat unul dintre primele în procesul de seroconversie (producerea de anticorpi ca răspuns la prezența virusului), indică severitatea procesului infecțios și indică o încărcătură virală mare. Cu ajutorul lor, hepatita C ereditară este determinată la pacienții care nu suspectează prezența infecției. Prelungirea prezenței NS3 anti-HCV în ser, indică un risc ridicat de cronică a procesului.
  • AntiHCVNS4 sugerează că procesul infecțios are un curs lung. Nivelul titrurilor de anticorpi poate fi evaluat în funcție de gradul de afectare a ficatului.
  • AntiHCVNS5 indică prezența ARN viral. Descoperirea lor în perioada acută este un precursor al cronicității procesului. Titrurile de anticorpi înalte pe fundalul tratamentului sugerează că pacientul nu răspunde la tratament.
  • AntiHCVNS4 și antiHCVNS5. Acest tip de anticorpi apare în fazele ulterioare ale dezvoltării hepatitei. Reducerea acestora indică formarea remisiunii procesului infecțios. După tratament, titrurile NS4 anti-HCV și NS5 anti-HCV sunt reduse în intervalul de la 8 la 10 ani. Acest tip de anticorp nu protejează împotriva reinfecției.

Fig. 2. Macrodrug al unui ficat. Ciroza hepatică la hepatita C.

Analiza decodificării pentru hepatita C

Absența anticorpilor la virusul hepatitei C este indicată de termenul "Norm". Cu toate acestea, acest lucru nu înseamnă întotdeauna absența bolii la om. Astfel, se înregistrează absența anticorpilor în sângele unei persoane infectate până când apar în sânge - până la 6 luni de la momentul infectării (o medie de 12 săptămâni). Perioada de absență a anticorpilor în sângele unei persoane infectate este numită "fereastră serologică". Sistemele de testare din generația a treia (ELISA-3) au o specificitate ridicată (până la 99,7%). Aproximativ 0,3% au reprezentat rezultate fals pozitive.

Prezența anti-HCV indică o infecție actuală sau o infecție din trecut.

  • Detectarea anticorpilor IgM și a IgG IgG Cor Cor anti-HCV, creșterea titrului de IgG IgG anti-HCV și (+) PCR în prezența semnelor clinice și de laborator ale hepatitei acute indică o perioadă acută a bolii.
  • Detectarea IgG anti-IgM, anti-HCV IgG IgG și anti-HCV NS IgG și (+) PCR conduce la prezența semnelor clinice și de laborator ale hepatitei, ceea ce indică reactivarea hepatitei cronice C.
  • Detectarea IgG anti-HCV IgG IgG și anti-HCV NS în absența semnelor clinice și de laborator ale hepatitei și un rezultat PCR negativ indică faptul că pacientul are hepatită cronică în faza latentă.

Fig. 3. Macrodrug al unui ficat. Cancerul hepatic primar. Unul dintre motivele dezvoltării oncologiei este ciroza hepatică dezvoltată pe fondul hepatitei cronice C.

Analiza PCR pentru hepatita C

Reacția în lanț a reacției polimerazice (PCR) este "standardul de aur" pentru diagnosticarea hepatitei virale C. Sensibilitatea ridicată a testului face posibilă detectarea materialului genetic al virusurilor (ARN), chiar dacă în materialul studiat sunt doar câteva dintre acestea. PCR este capabil să detecteze virusurile ARN cu mult înainte de apariția anticorpilor în ser, dar nu mai devreme de ziua a 5-a de la momentul infectării. Atunci când o boală este detectată prin PCR, virusurile ARN sunt detectate nu numai în ser, ci și în biopatii hepatice.

  • Reacția în lanț a reacției polimerazice permite determinarea prezenței sau absenței virusurilor hepatitei C în sânge și decizia privind începerea tratamentului. Se știe că până la 30% dintre pacienți elimină singură infecția, deoarece au un sistem imunitar puternic și nu au nevoie de tratament.
  • PCR pentru hepatita C este utilizat pentru a monitoriza eficacitatea tratamentului.
  • PCR este utilizat în absența anticorpilor în sânge, dar în prezența unor suspiciuni puternice de hepatită C (niveluri crescute ale fosfatazei alcaline, bilirubinei totale, exces de două ori a enzimelor hepatice AST și ALT).
  • Analiza PCR pentru hepatita C este utilizată pentru a controla transmiterea intrauterină a virusurilor hepatitei.

Hepatita C incarcatura virala

Utilizând analiza PCR, este posibil să se determine nu numai prezența ARN-ului virusului în sânge - o analiză calitativă (detectată / detectată), dar numărul lor - încărcătura virală (numărul de unități de ARN viral în 1 ml de sânge). Indicatorul PCR cantitativ este folosit pentru a monitoriza eficacitatea tratamentului hepatitei C.

Metodele utilizate pentru PCR au sensibilitate diferită. În Federația Rusă, în conformitate cu recomandările metodologice din 2014, se recomandă aplicarea metodelor care au o sensibilitate de 25 UI / ml sau mai puțin. În conformitate cu recomandările Asociației Europene pentru Studiul Ficatului din 2015, se propune aplicarea metodelor de determinare a ARN-ului viral cu o sensibilitate de 15 UI / ml sau mai puțin.

În funcție de sensibilitatea sistemului de testare, pacientul primește unul sau alt rezultat al studiului:

  • Sensibilitatea minimă a analizorului COBAS AMPLICOR este de 600 UI / ml (analizorul vechii generații).
  • Sensibilitatea minimă a analizorului HCB-TEST COBAS AMPLICOR este de 50 UI / ml, care este de 100 de exemplare pe ml.
  • Sensibilitatea minimă a analizorului HCV RealBest ARN este de 15 UI / ml, care este de 38 de copii per ml (inclusă în grupul sistemelor moderne de testare). Specificitatea acestor analizoare este de 100%. Cu ajutorul lor, sunt detectate ARN-uri ale virusurilor hepatitei C de subtipurile 1a și 1b, 2a, 2b, 2c și 2i, 3, 4, 5a și 6.

Dacă există copii ale ARN sub pragul de sensibilitate al acestui analizor, pacientul primește răspunsul "nu este detectat".

Fig. 4. Un exemplu de analiză PCR (test cantitativ). Sarcina virală este determinată pentru hepatita C.

Interpretarea rezultatelor analizei PCR pentru hepatita C

  • Absența virusului ARN indică absența infecției.
  • Absența ARN împotriva prezenței anticorpilor în sânge indică dispariția virusului hepatitei C sub influența tratamentului sau cu auto-vindecare.
  • În unele cazuri, virusul este prezent în sânge, dar la niveluri subliminale, când concentrația acestuia nu este capturată de către analizatori. Acești pacienți rămân periculoși în ceea ce privește infecția.
  • Detectarea virusului ARN timp de 6 luni consecutive la pacienții cu hepatită acută C sugerează că boala a suferit o evoluție cronică.
  • Reducerea ARN-ului viral în timpul tratamentului indică eficacitatea terapiei și invers.

Fig. 5. Hepatoză grasă. Una dintre cauzele afectării hepatice este hepatita virală C.

Teste biochimice de bază pentru hepatita C

Testele de sânge biochimice ajută la stabilirea stării funcționale a multor organe și sisteme umane.

Enzime hepatice ALT și AST

Enzimele hepatice sunt sintetizate intracelular. Aceștia sunt implicați în sinteza aminoacizilor. Un număr mare dintre acestea se găsesc în celulele ficatului, inimii, rinichilor și mușchilor scheletici. Odată cu înfrângerea organelor (încălcarea integrității membranelor celulare), enzimele intră în sânge, unde crește nivelul lor. Nivelurile ridicate de enzime sunt înregistrate cu înfrângerea (liza, distrugerea) celulelor hepatice, infarctul miocardic și alte boli. Cu cât este mai mare nivelul transaminazelor din ser, cu atât mai multe celule au fost distruse. ALT predomină în celulele hepatice, AST - în celulele miocardice. Odată cu distrugerea celulelor hepatice, nivelul ALT crește de 1,5 - 2 ori. Odată cu distrugerea celulelor miocardice, nivelul AST crește de 8 - 10 ori.

Atunci când se diagnostichează hepatita virală cronică, este necesar să se acorde atenție raportului AST / ALT (coeficient de Ritis). Un exces de AST peste ALT indică afectarea celulelor hepatice.

  • Norma AST pentru bărbați este de până la 41 unități / l, femeile - până la 35 unități / l, copiii de peste 12 ani - până la 45 unități / l.
  • Norma ALT pentru bărbați este de până la 45 unități / l, femeile - până la 34 unități / l, copiii cu vârsta de 12 ani și peste - până la 39 unități / l.
  • În mod normal (la persoanele sănătoase), raportul AST / ALT variază de la 0,91 la 1,75.

bilirubina

Bilirubina este un produs de defalcare a hemoglobinei. Bilirubina din sânge se găsește sub formă indirectă (până la 96%) și directă (4%). Procesul de descompunere a acestei substanțe apare în principal în celulele ficatului, unde se excretă din organism cu bilă. Odată cu distrugerea celulelor hepatice, nivelul bilirubinei din ser crește. În mod normal, conținutul total de bilirubină este mai mic de 3,4 - 21,0 μmol / L La un nivel de 30-35 μmol / l și mai sus, bilirubina penetrează țesuturile, datorită cărora pielea și sclera devin icter.

Fig. 6. Când hepatita C în sânge crește nivelul de bilirubină. Substanța pătrunde în țesuturi, motiv pentru care pielea și sclera devin icterice.

Diagnosticarea PCR pentru hepatita C

Hepatita C este o inflamație a celulelor hepatice care apare ca urmare a infecției cu virusul VHC (hepatita C) prin contactul cu sângele unei persoane infectate. Codul genetic al HCV-ului flavivirus este purtat de o moleculă de ARN (acid ribonucolic) conținută în structura virusului. Acest fenomen care pune viața în pericol se distinge prin secret în stadiul inițial al patologiei. Intervalul de timp dintre infecție și debutul simptomelor (răspunsul sistemului imunitar) poate fi de la o lună la șase luni. De regulă, boala are o formă cronică și este dificil de tratat.

Medicina moderna va permite sa diagnosticati patologia cu leziuni hepatice minore. Cele mai frecvente și eficiente metode de diagnostic includ analiza PCR. Luați în considerare în acest articol ce este și ce fel de ea există.

Care este studiul

Analiza PCR pentru hepatita C este un examen de laborator care detectează flavirusul, materialul genetic al acidului ribonucleic (ARN). Acesta determină numărul moleculelor de ARN din sânge, calitatea materialului biologic, tipul genetic al flaviului HCV.

Metoda PCR pentru hepatita C face posibilă detectarea cantității minime de flavirus înainte de formarea anticorpilor, de regulă, imediat după infectare.

Studiul este adesea denumit analiză ARN, deoarece detectează particule de acid ribonucleic având dimensiunea de 30-60 nm conținută într-un virus flava.

Studiul se desfășoară după cum urmează: pe stomacul gol, pacientul dă sânge dintr-o venă, care este apoi testată prin diverse metode:

  • Real-Time PCR se efectuează într-un mod automat închis și are o limită inferioară pentru detectarea virusurilor ARN de 15 UI / ml;
  • COBAS AMPLICOR cu o sensibilitate de 50-100 UI / ml.

Cu cât este mai mare pragul de sensibilitate al tehnicii de diagnosticare, cu atât sunt mai mari șansele de a detecta cel mai mic conținut de virus în materialul biologic studiat.

Ce tipuri de analiză sunt utilizate

O analiză care a fost utilizată cu succes de câteva decenii se numește hepatită PCR și poate fi detectată destul de ușor și rapid. În medicină, există două metode de reacție, fundamental diferite unul de celălalt:

  • metoda calitativă relevă prezența în materialul biologic a sursei genetice a unui anumit virus;
  • analiza cantitativă măsoară numărul de materii genetice, ceea ce permite determinarea stadiului patologiei sau evaluarea eficacității cursului terapeutic;
  • genotiparea determină tipul de virus prezent în organism.

În general, un test de sânge ajută la identificarea naturii viremiei și a tipului genetic al agentului patogen. De regulă, studiul este efectuat o dată în funcție de gradul de sensibilitate al sistemului de diagnosticare. Dacă este necesar, retestarea se efectuează cu ajutorul unui reactiv ultrasensibil.

PCR de înaltă calitate

Ce este ARN PCR de înaltă calitate pentru hepatita C? Esența reacției constă în prezența secvenței ARN de hepatită, iar reacția este posibilă numai în prezența proteinelor virale cu o etimologie similară în ELISA. În procesul de comparație, se detectează sarcina și posibilele deteriorări ale ficatului.

O caracteristică distinctivă a acestei metode este capacitatea de a detecta chiar prezența unei gene separate.

Trebuie remarcat faptul că după primirea rezultatelor testelor PCR și ELISA, pacientul are nevoie de un tratament adecvat, indiferent de rezultatul final al imunotestului enzimatic. Pozitive indică o infecție, iar PCR negativ indică un număr redus de particule virale față de nivelul de sensibilitate.

Există mai multe condiții care afectează producerea unui PCR negativ și a unui test ELISA:

  • lipsa condițiilor adecvate pentru colectarea de materiale;
  • analiza rezultată conține contaminare;
  • în cazul unei injecții precoce de heparină către pacient.

Din partea pacientului, nu este necesar să se respecte anumite reguli pentru eșantionarea sângelui pentru analiza PCR, în acest caz calitatea acestei analize depinde de medicul profesionist care efectuează procedura. Capacitatea de a stabili prezența bolii (în special în forma acută) apare în câteva săptămâni după infectare.

Analiza cantitativă

Este recomandat un test cantitativ pentru a detecta incarcatura virala imediat inainte de formarea unei terapii viitoare si a reactiei organismului. Procesul de prelevare a probelor de sânge se desfășoară într-un mod similar cu cel al PCR de înaltă calitate și ELISA, singura condiție fiind absența posibilității de a fuma pacientul înainte de procedură.

În ceea ce privește caracteristicile obținute din studiul datelor, sarcina crescută se caracterizează prin indicatori de la 800000 UI / ml, cu un nivel scăzut de 400000 UI / ml. Prezența unui virus în corpul pacientului este indicată de PCR pentru hepatită nu este un test calitativ negativ.

Acest tip de cercetare face posibilă determinarea cât de periculoasă este pacientul față de oamenii din jurul lui. De exemplu, identificarea unui nivel ridicat indică o infecție crescută a pacientului. În plus, rezultatele analizei ajută la formularea celei mai eficiente tratamente și determină măsura în care terapia existentă este considerată eficientă.

Răspunsul rapid rapid al testelor indică succesul tehnicii alese, iar cea lentă indică nevoia de ajustări și utilizarea diverselor tratamente.

Procesul de luare a procedurii de analiză depinde de ziua specifică a bolii. Prima determinare se efectuează în prima zi după ce pacientul este admis la spital, apoi procedura se repetă la 4, 12 și 24 de săptămâni după administrarea medicamentelor.

Astfel, o analiză cantitativă arată ce tratament este cel mai eficient, durata terapiei disponibile și pericolul pacientului față de alte persoane.

genotipare

În studiul analizei materiale, este important să se determine precizia genotipului virusului care are loc. În prezent, există 11 soiuri de virus hepatitic C, care la rândul lor includ anumite subspecii.

Toate aceste specii răspund diferit la tratamente diferite, iar speciile individuale sunt absolut rezistente la multe medicamente.

Genotipul face posibilă determinarea și arătarea stării ficatului. Nu este neobișnuit ca rezultatele să fie înregistrate "fără tastare", ceea ce înseamnă că virusul din sângele pacientului nu este detectat de acest sistem de testare. Acest lucru poate fi detectat dacă un anumit genotip nu corespunde acestei zone. Într-o astfel de situație, analiza este efectuată în mod repetat și se utilizează un sistem mai sensibil pentru a studia materialul.

Metoda ultra sensibilă

Metoda ultrasensibilă este necesară în anumite cazuri în care diagnosticul de hepatită nu poate fi efectuat prin alte metode și când se efectuează o analiză este determinată de medicul curant:

  • în cazul suspiciunii de prezență a virusului hepatitei C la pacienții cu un tip latent al bolii;
  • prezența anticorpilor împotriva virusului hepatitei C, neconfirmată prin diagnosticarea PCR;
  • pentru a determina calitatea eficacității metodei de tratament alese și pentru a confirma eliminarea bolii.

Sensibilitatea acestei metode este mult mai mare decât cea utilizată în mod obișnuit, însă această metodă nu exclude obținerea de rezultate false, atât pozitive, cât și negative. Într-o astfel de situație, este important să se controleze calitatea procedurii și posibilitatea contaminării materialului însuși.

Explicarea analizei PCR

Decodificarea analizei se efectuează pe baza materialelor prezentate, în timp ce rezultatele studiilor de laborator includ anumite date descrise mai sus.

Decodificarea poate include o reacție în lanț PCR polimerazică pozitivă și un test ELISA negativ în analiză, ceea ce înseamnă că pacientul nu are semne de hepatită C în sânge, dar în trecut a transferat forma acută a bolii. De regulă, la diagnosticare, specialiștii recurg la utilizarea indicatorilor de test PCR.

Rezumând toate cele de mai sus, se poate concluziona că în timpul analizei este important să se respecte toate regulile și recomandările, astfel încât rezultatele obținute să fie cât mai exacte posibil și pe baza datelor obținute este posibil să se determine eficacitatea terapiei utilizate și șansele de recuperare completă.

Analiza PCR pentru hepatita C

Pentru diagnosticul de "hepatită virală cronică C (CVHS)" este necesară o examinare cuprinzătoare a persoanei, care include studii clinice, de laborator și instrumentale. Important din punct de vedere al diagnosticului pentru diagnosticul corect este metoda PCR - reacția în lanț a polimerazei.

Ce arată această analiză și de ce este necesar?

Această metodă de laborator detectează ARN-ul virusului hepatitei C în sângele uman. Împreună cu testul imunosorbant legat de enzime (ELISA) pentru anticorpi împotriva virusului, se utilizează PCR pentru a face un diagnostic al CVHC și a genotipului agentului său patogen. Această cercetare este una dintre cele mai noi metode de diagnosticare de laborator. Fiabilitatea sa la CVHS depășește 97%, ceea ce este considerat un indicator foarte bun pentru cercetare.

Există trei analize PCR de sânge pentru CVHC: genotipări calitative, cantitative și viruși. Primul studiu (analiza calitativă) a unui virus îl detectează în sânge și, prin urmare, este folosit doar pentru diagnosticare.

Al doilea studiu (cantitativ) determină gradul de încărcare virală pe corp, prin urmare, este utilizat pentru a monitoriza eficacitatea terapiei.

Al treilea PCR (genotipare) clarifică diagnosticul, stabilind genotipul virusului, ceea ce este foarte important pentru numirea corectă a tratamentului antiviral.

Esența tehnicii de reacție în lanț a polimerazei este utilizarea enzimelor care înmulțesc materialul genetic al agentului patogen în biomaterial. În procesul de replicare, tubul cu sânge este încălzit de mai multe ori și răcit la temperatura necesară pentru accelerarea reacției enzimatice. Ca rezultat al acestor manipulări, cantitatea de genom viral crește de mai multe ori, permițându-i să fie detectată chiar și cu o cantitate minimă.

Diagnosticarea PCR are multe avantaje față de alte teste de laborator:

  • sensibilitate ridicată - 97-98%;
  • specificitate analitică garantată (dezvăluie exact agentul patogen pe care doriți să îl găsiți, și nu tulpina acestuia);
  • viteza de desfășurare (nu durează mai mult de 2 zile pentru a obține o concluzie).

Trei tipuri de teste PCR

Analiza PCR de înaltă calitate este atribuită tuturor pacienților în care analiza ELISA a detectat anticorpi împotriva virusului HVGS. După efectuarea PCR de înaltă calitate, se pot obține două opțiuni de răspuns: "ARN-ul este detectat" sau "ARN-ul nu este detectat". Pentru a detecta cantitatea minimă de virus în sânge, sunt necesare sisteme de testare cu o sensibilitate de cel puțin 50 UI / ml. Dacă concentrația virusului în sângele pacientului este mai mică decât cea determinată de diagnostic, rezultatul studiului poate fi fals negativ. Pentru a evita o astfel de eroare de diagnostic, laboratoarele care efectuează diagnosticarea PCR trebuie să fie prevăzute cu sisteme de testare foarte sensibile. În laboratorul "Invitro" se utilizează, de exemplu, teste cu sensibilitate de 15 UI / ml. Lucrătorii din laboratoare sunt obligați să furnizeze pacienților și medicilor informații privind sensibilitatea testelor la prima lor cerere.

Analiza cantitativă a PCR determină gradul de viremie, adică concentrația agentului patogen în sânge, încărcătura virală. Rezultatul acestui studiu, spre deosebire de PCR de înaltă calitate, este exprimat în numere, de exemplu 2 × 10 * 6 UI / ml, ceea ce înseamnă 2 milioane de unități internaționale în 1 ml de sânge. Unele laboratoare utilizează un alt indicator - numărul de copii / ml. Acești doi indicatori sunt ușor de convertit: 1 unitate internațională este egală cu 4 copii de ARN. Astfel, 2 x 10 x 6 UI / ml va însemna că 8 x 10 x 6 copii de ARN viral în 1 ml, adică 8 milioane de copii în 1 ml de sânge.

Genotiparea este definiția uneia dintre cele șase genotipuri ale unui virus. Imaginea clinică, rata de dezvoltare a complicațiilor hepatice și prognosticul pentru viitoarea viață a pacientului depind de genotipul agentului cauzal. Genotipul virusului este foarte important deja în stadiul diagnosticului, deoarece combinația de medicamente și durata cursului terapeutic care urmează a fi atribuită pacientului depind de determinarea sa corectă.

Cu toate acestea, chiar și această cercetare aparent "perfectă" a laboratoarelor are dezavantaje:

  • studiul replică materialul genetic al tuturor agenților patogeni, chiar și cei care nu trăiesc, ceea ce poate distorsiona rezultatul. Prin urmare, pentru a monitoriza eficacitatea cu ajutorul PCR, o reanaliză se realizează nu mai devreme de 2 luni de la cea precedentă, astfel încât virusii morți pot "părăsi" pacientul;
  • o parte a genomului viral, care este determinată prin utilizarea sistemelor de testare, poate fi teoretic prezentă în alte virusuri sau microorganisme, deci există o posibilitate de răspuns fals pozitiv;
  • virușii se mută repede. Uneori viteza și amploarea mutațiilor virale sunt atât de ridicate încât sistemul de testare nu mai atinge genomul. Ca urmare, este posibil un rezultat fals negativ.

Pentru a rezolva aceste neajunsuri, producătorii de sisteme de testare de laborator pentru diagnosticarea PCR efectuează în mod constant testele lor, inclusiv reacțiile încrucișate și sensibilitatea la un anumit genotip al virusului.

Cum se face un test PCR pentru hepatita C?

Pentru ca încheierea unui examen PCR să fie fiabilă, este necesar să se respecte cu strictețe regulile de pregătire pentru comportamentul său:

  • cercetarea este efectuată pe stomacul gol (glucoză, grăsimi, minerale, care intră în sânge din alimente, pot afecta viteza și calitatea reacției enzimatice);
  • decalajul dintre ultima masă și prelevarea de probe de sânge pentru analiză trebuie să fie de cel puțin 8 ore;
  • în ajunul studiului este interzis să consumați alcool și să consumați alimente grase, perioada de eliminare a acestora fiind prelungită;
  • o zi înainte de a merge la laborator ar trebui să evite stres fizic și emoțional puternic;
  • până când nu se recomandă să se fumeze în timpul eșantionării sângelui.

Pentru a evita apariția unor concluzii false, presupusul pacient trebuie să vină la laborator puțin mai devreme decât sângele va fi luat. Este nevoie de 15-20 de minute pentru ca o persoană să-și prindă respirația, să se calmeze. Adrenalina, care este prezentă în sânge după o plimbare rapidă, poate afecta rezultatul examinării.

Dacă pacientul care face referire la analiză ia medicamente, el trebuie să informeze medicul despre acest lucru. Este posibil ca unele dintre ele să fie refuzate de ceva timp (dacă este posibil).

Rezultatul analizei PCR pentru hepatita C

Decodarea rezultatelor implicate în medicul de laborator al laboratorului care a efectuat analiza. Decodificarea este definiția deviației rezultatului obținut din normă. Rata indicatorilor este stabilită direct de către producătorul sistemului de testare, care este utilizat de laboratorul de diagnosticare. Prin urmare, nu este surprinzător faptul că, în unele laboratoare, încărcătura virală este determinată în UI / ml, iar în altele în copii / ml.

După ce am obținut concluzia, este necesar să o putem interpreta în mod corect. Tratamentul rezultatelor studiului trebuie efectuat de către medicul curant al pacientului cu hepatită C. Doar după o examinare obiectivă, instrumentală și de laborator a pacientului, medicul poate obține o cantitate suficientă de date pentru interpretarea corectă a rezultatelor PCR obținute.

Evaluarea analizei calitative, ca regulă, nu cauzează dificultăți nici la pacienți. Rezultatul poate fi unul singur: "detectat" sau "nu a fost detectat". În acest caz, a doua este norma.

Indicatorii de analiză cantitativă sunt mai dificil de interpretat. Acesta arată gradul de încărcare virală la pacient. Chiar si printre hepatologi, nu exista un consens cu privire la modul de tratare a viremiei detectate. Majoritatea medicilor sunt înclinați să creadă că ar trebui luată în considerare o sarcină mare de mai mult de 8 × 10 * 5 UI / ml. O sarcină mai mare de 1 × 10 * 7 UI / ml este considerată foarte ridicată, în timp ce o sarcină scăzută este mai mică de 4 × 10 * 5 UI / ml.

Gradul de încărcare virală sugerează virulența (agresivitatea) virusului: cu cât este mai mare cantitatea în sânge, cu atât mai repede se pot dezvolta complicațiile ficatului. O concentrație ridicată a virusului în sângele unei femei însărcinate crește probabilitatea penetrării sale prin bariera hemato-placentară la făt. Viremia afectează, de asemenea, eficacitatea tratamentului: cu un număr redus, eficacitatea terapiei este mai ridicată decât cea înaltă.

Pentru a fi încrezători în exactitatea analizei PCR pentru hepatita C, este necesar să acordați prioritate numai acelor laboratoare care au funcționat bine. Politica de prețuri în acest caz nu ar trebui să joace un rol primordial.


Mai Multe Articole Despre Ficat

Hepatită

Durere în vezica biliară cu pancreatită

Simptomele și semnele de oleicistă și pancreatită - tratamentul lor, cum sunt acestea diferite?Publicat: 15 octombrie la 10:28Odată cu înfrângerea aceleiași boli situată lângă și având funcții similare de organe, progresează mult mai repede.
Hepatită

Anticorpii hepatitei A

Agentul cauzal al hepatitei virale A este un virus neînvelit care conține ARN cu un diametru de 27 nm, rezistent la căldură, acizi și esteri.Agentul cauzator al hepatitei virale A se referă la enterovirusuri, tip 72.